第十章 二、影响分离的因素 液相色谱分析法 factors influenced separation 二、分离类型的选择 high performance liquid choice of separation types chromatograph 三、液相色谱的应用 第四节 application of HPLC 影响分离的因素与操 四、液相制备色谱 作条件的选择 preparative liquid chromatography factors influenced separation and choice of operation condition 下一页 23:09:58
23:09:58 第十章 液相色谱分析法 一、影响分离的因素 factors influenced separation 二、分离类型的选择 choice of separation types 三、液相色谱的应用 application of HPLC 四、液相制备色谱 preparative liquid chromatography 第四节 影响分离的因素与操 作条件的选择 high performance liquid chromatograph factors influenced separation and choice of operation condition
影响分离的因素 factors influenced separation 1.影响分离的因素与提高柱效的途径 在高效液相色谱中，液体的扩散系数仅为气体的万分之一 则速率方程中的分子扩散项B较小，可以忽略不计，即： H=A+Cu 故液相色谱H-曲线与气相色谱的形状不同，如图所示。 GC LC 23:0958
23:09:58 一、影响分离的因素 factors influenced separation 1. 影响分离的因素与提高柱效的途径 • 在高效液相色谱中, 液体的扩散系数仅为气体的万分之一 ，则速率方程中的分子扩散项B/U较小，可以忽略不计，即： H = A + C u 故液相色谱H-u曲线与气相色谱的形状不同，如图所示
液体的黏度比气体大一百倍，密度为气体的一千倍，故 降低传质阻力是提高柱效主要途径。 由速率方程，降低固定相粒度可提高柱效。 液相色谱中，不可能通过 GC 增加柱温来改善传质。恒温 改变淋洗液组成、极性是 改善分离的最直接的因素。 23:09:58
23:09:58 • 液体的黏度比气体大一百倍，密度为气体的一千倍，故 降低传质阻力是提高柱效主要途径。 • 由速率方程，降低固定相粒度可提高柱效。 • 液相色谱中，不可能通过 增加柱温来改善传质。恒温 • 改变淋洗液组成、极性是 改善分离的最直接的因素
2.流速 流速大于0.5cm/s时，Hu 曲线是一段斜率不大的直线。 GC 降低流速，柱效提高不是很大。 但在实际操作中，流量仍是一 个调整分离度和出峰时间的重 u 要可选择参数。 3.固定相及分离柱 气相色谱中的固定液原则上都可以用于液相色谱，其 选用原则与气相色谱一样。但在高效液相色谱中，分离柱 的制备是一项技术要求非常高的工作，一般很少自行制备。 23:09:58
23:09:58 2.流速 流速大于0.5 cm/s时, H～u 曲线是一段斜率不大的直线。 降低流速，柱效提高不是很大。 但在实际操作中，流量仍是一 个调整分离度和出峰时间的重 要可选择参数。 3.固定相及分离柱 气相色谱中的固定液原则上都可以用于液相色谱，其 选用原则与气相色谱一样。但在高效液相色谱中，分离柱 的制备是一项技术要求非常高的工作，一般很少自行制备
二、分离类型选择 choice of separation types 表 液相色谱分离类型选择参考表 溶于水一排阻色谱，水为流动相 相对分子质量 >2000 不溶于水— 排阻色谱，非水流动相 同系物— 分配色谱 不 溶于水 异构体— 吸附色谱 样品 分子大小差异—排阻色谱 反相液-液色谱 溶于水，不离解 相对分子质量 排阻色谱，水为流动相 <2000 碱 阳离子交换色谱 溶于水，可离解 酸一 阴离子交换色谱 溶于水，离子与非离子 反相离子对色谱 23:09:58
23:09:58 二、分离类型选择 choice of separation types