BUCT 讨论 >GC可分离料液体积介于V和V之间的溶质,分 配系数为0≤m≤1。 >GFC的分离精度有限,料液的处理量也很小
BUCT 6 ➢GFC可分离料液体积介于V0和Vt之间的溶质,分 配系数为0<m<l。 ➢GFC的分离精度有限,料液的处理量也很小。 讨论
二、凝胶过滤介质 BUCT 1、应用 蛋白质等生物大分子的分级分离和除盐 2、 介质的要求 ① 亲水性高,表面惰性; 稳定性强,在较宽的H和离子强度范围以及化学 试剂中保持稳定,使用寿命长; ③具有一定的孔径分布范围: ④机械强度高,允许较高的操作压力(流速)
BUCT 7 ① 亲水性高,表面惰性; ② 稳定性强,在较宽的pH和离子强度范围以及化学 试剂中保持稳定,使用寿命长; ③ 具有一定的孔径分布范围; ④ 机械强度高,允许较高的操作压力 (流速)。 二、 凝胶过滤介质 蛋白质等生物大分子的分级分离和除盐 2、介质的要求 1、应用
3、介质的种类 BUCT (1)Sephadex G是最传统的软凝胶过滤介质,是利用 葡聚糖交联制备的,交联剂采用环氧氯丙烷。G后 面的数字越大表示孔径越大,排阻极限也越大。 2琼脂糖疑胶Sepharose机械强度较低。Sepharose CL是利用环氧氯丙烷交联制备的琼脂糖凝胶,机械 强度较普通Sepharoser高。 (3)TSK凝胶是利用亲水性合成高分子制备的凝胶过 滤介质,有较高的机械强度,其中W系列为半刚性 凝胶,适用于中压液相层析;PW系列机械强度更高 适用于高压液相层析
BUCT 8 (1) Sephadex G是最传统的软凝胶过滤介质,是利用 葡聚糖交联制备的,交联剂采用环氧氯丙烷。G后 面的数字越大表示孔径越大,排阻极限也越大。 3、介质的种类 (2)琼脂糖凝胶Sepharose机械强度较低。Sepharose CL是利用环氧氯丙烷交联制备的琼脂糖凝胶,机械 强度较普通Sepharose高。 (3) TSK凝胶是利用亲水性合成高分子制备的凝胶过 滤介质,有较高的机械强度,其中HW系列为半刚性 凝胶,适用于中压液相层析; PW系列机械强度更高 ,适用于高压液相层析
BUCT (4)Superdex)凝胶粒径为24-44um,分离精度高 适用于高效液相层析。 (5)Superose常用于高效离子交换层析和高效亲 和层析的载体
BUCT 9 (4)Superdex凝胶粒径为24-44m,分离精度高, 适用于高效液相层析。 (5)Superose常用于高效离子交换层析和高效亲 和层析的载体
凝胶特性参数 BUCT 排阻极限(exclusion limit): ★ 指不能扩散到凝胶网络内部的最小分子的相对分子质 量。其洗脱体积为V。 (2)分级范围(fractionation range): 能为凝胶阻滞并且相互之间可以得到分离的溶质 的相对分子质量范围。 10
BUCT 10 (l)排阻极限(exclusion limit): 指不能扩散到凝胶网络内部的最小分子的相对分子质 量。其洗脱体积为V0。 4、凝胶特性参数 (2)分级范围(fractionation range): 能为凝胶阻滞并且相互之间可以得到分离的溶质 的相对分子质量范围