●●。第八章免疫学实验技术 免疫学实验技术 是指利用免疫反应特异性的原理,建立的各种检测与分析以 及建立这些技术的各种制备方法。 包括: (1)免疫血清学技术如沉淀试验等; (2)细胞免疫学技术如免疫细胞功能鉴定等; (3)免疫学制备技术如高免血清制备等
第八章 免疫学实验技术 免疫学实验技术 是指利用免疫反应特异性的原理,建立的各种检测与分析以 及建立这些技术的各种制备方法。 包括: (1)免疫血清学技术 如沉淀试验等; (2)细胞免疫学技术 如免疫细胞功能鉴定等; (3)免疫学制备技术 如高免血清制备等
第一节免疫血清学技术 抗原与相应抗体在体内和体外均能发生特异性结合,因抗 体主要来自血清,因此在体外进行的抗原抗体反应称为血清学 反应或免疫血清学技术 、免疫血清学技术的类型 (1)凝聚性反应:凝集试验和沉淀试验 (2)标记抗体技术:荧光抗体技术、酶标抗体技术、放射 性同位素标记抗体技术、发光标记抗体技术等 (3)有补体参与的反应:如补体结合反应 (4)中和反应:如病毒中和试验、毒素中和试验 (5)免疫复合物散射技术:如激光散射免疫技术 (6)电免疫反应:如免疫传感器技术 (7)免疫转印技术:如 Western Blotting
第一节 免疫血清学技术 一、免疫血清学技术的类型 (1)凝聚性反应:凝集试验和沉淀试验 (2)标记抗体技术:荧光抗体技术、酶标抗体技术、放射 性同位素标记抗体技术、发光标记抗体技术等 (3)有补体参与的反应:如补体结合反应 (4)中和反应:如病毒中和试验、毒素中和试验 (5)免疫复合物散射技术:如激光散射免疫技术 (6)电免疫反应:如免疫传感器技术 (7)免疫转印技术:如Western Blotting 抗原与相应抗体在体内和体外均能发生特异性结合,因抗 体主要来自血清,因此在体外进行的抗原抗体反应称为血清学 反应或免疫血清学技术
免疫血清学反应的一般特点 1.特异性与交叉性 具有高度特异性 The ability of an individual antibody combining site to react with only one antigenic determinant The ability of a population of antibody molecules to react with only one antigen 若存在共同抗原,则发生交叉反应。 The ability of an individual ab combining site to react with more than one antigenic determinant The ability of a population of ab molecules to react with more than one Ag
1. 特异性与交叉性 具有高度特异性 • The ability of an individual antibody combining site to react with only one antigenic determinant. • The ability of a population of antibody molecules to react with only one antigen. 若存在共同抗原,则发生交叉反应。 • The ability of an individual Ab combining site to react with more than one antigenic determinant. • The ability of a population of Ab molecules to react with more than one Ag 二、免疫血清学反应的一般特点
2.抗原抗体结合机理 High affinity Low Affinity (1)可逆性,分子表面结合 ab Ab 2)比例适当 (3)存在二阶段性,即结合 阶段和可见阶段 Ag Ag A g excess Ab excess attice formatⅰon 3.免疫血清学反应的影响因素 (1)电解质(2)温度(3)酸碱度(4)振荡(5)杂质
2. 抗原抗体结合机理 (1) 可逆性,分子表面结合 (2) 比例适当 (3) 存在二阶段性,即结合 阶段和可见阶段 Ab Ag High Affinity Ab Ag Low Affinity Ag excess Equivalence – Lattice formation Ab excess 3. 免疫血清学反应的影响因素 (1) 电解质 (2) 温度 (3) 酸碱度 (4) 振荡 (5) 杂质
凝聚性试验 抗原与相应抗体结合形成竞疫复合物,在电解质存在下, 免疫复合物相互凝聚形成肉眼可见的凝小块或沉淀物,以 判定是否存在相应的抗体或抗原,称为凝聚性试验。 根据参与反应的抗原性质不同,可分为两大类: (1)凝集试验 agglutination test) 主要是颗粒性抗原参与 (2)沉淀试验( precipitation test 主要是可溶性抗原参与
三、凝聚性试验 抗原与相应抗体结合形成免疫复合物,在电解质存在下, 免疫复合物相互凝聚形成肉眼可见的凝集小块或沉淀物,以此 判定是否存在相应的抗体或抗原,称为凝聚性试验。 根据参与反应的抗原性质不同,可分为两大类: (1)凝集试验(agglutination test) 主要是颗粒性抗原参与 (2)沉淀试验(precipitation test) 主要是可溶性抗原参与