PCR技术简史 >1985年,美国 PE-Cetus公司 的Mus等人发明PCR >基本原理是在试管中模拟细 胞内的DNA复制 >1993年, Mullis等因此项技 术获诺贝尔化学奖
PCR技术简史 1985年，美国PE-Cetus公司 的Mullis等人发明PCR 基本原理是在试管中模拟细 胞内的DNA复制 1993年，Mullis等因此项技 术获诺贝尔化学奖
Muis的构思 引物DNA聚合酶 DNA聚合酶引物 ■■■■■■■■■■■■■■■■■ ■■■■■■■■■■■■■■■口■ 特定DNA片段
引物 引物 Mullis的构思 DNA聚合酶 DNA聚合酶 特定DNA片段
Taq dna聚合酶 100 酶 80 活 性60 40 20 温度(℃) 405060708090100
Taq DNA聚合酶 酶 活 性(%) 温度(℃) 40 50 60 70 80 90 100 100 80 60 40 20
PCR的基本原理 高温变性低温退火适温延伸 重复1-3步 温94 25~30轮 度 (C) 目的DNA片段 72 形成条单 子链延伸 扩增100万倍以上 DNA加倍 链DNA单链 22 与引物复性 DNA双螺旋 时间(min)
22 55 72 94 时间（min） 温 度 （℃） PCR的基本原理 适温延伸 3 高温变性 1 低温退火 2 重复1~3步 25~30轮 目的DNA片段 扩增100万倍以上 DNA双螺旋 DNA单链 与引物复性 DNA 变 性 形 成 2 条 单 链 子链延伸 DNA加倍
94℃C 模板DNA T「「「「「「「「「
PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 1 2 3 4 5 22 55 72 94 时间（min） 温 度 （℃） 适温延伸 3 高温变性 1 低温退火 2 重复1~3步 25~30轮 目的DNA片段 扩增100万倍以上 DNA双螺旋 DNA单链 与引物复性 子链延伸 DNA加倍 DNA 变 性 形 成 2 条 单 链 模板DNA 94℃