1.3噬菌体抗体库 ·将抗体全套可变区基因组装到噬菌体载体,并表达于噬菌体表面, 所得到的多样性噬菌体抗体的集合,称为噬菌体抗体库。 O利用噬菌体呈现技术,筛选并富集特异性抗体的过程,称为噬 菌体抗体库展示技术
1.3 噬菌体抗体库 •将抗体全套可变区基因组装到噬菌体载体,并表达于噬菌体表面, 所得到的多样性噬菌体抗体的集合,称为噬菌体抗体库。 ◎ 利用噬菌体呈现技术,筛选并富集特异性抗体的过程,称为噬 菌体抗体库展示技术
2.噬菌体抗体库产生的三项技术基础 ◆RT-PCR:能够克隆全套抗体可变区基因 ◆抗体基因片段在大肠杆菌的功能性表达 ◆噬菌体展示技术(phage gisplay):有效筛选和扩增 RNAn ONA RW22eo 8寄2256P Caene2 四
2.噬菌体抗体库的构建 65+ 6⊙9 ·基因的获取 Cell Gene Phagemid VHH Lib. ScFv Lib. Fab Lib •载体的构建、连接 •表达、淘选 •扩增、筛选 Screening ·鉴定、分析 Antibody
2.噬菌体抗体库的构建 •基因的获取 •载体的构建、连接 •表达、淘选 •扩增、筛选 •鉴定、分析
胚系V基因段 人B细胞 VH 基因拼接 PCR VH成Fd VL或轻链 抗体 厚钩 DNA重组 建流 程图 Display vector 库茵体抗体库 (1) 转化大肠杆茵
噬菌体抗体库流程图(2) sso 感染 和扩增 C E.coli Binder verncation by high-throughput soreening 0t7店 (b)
噬菌体抗体库流程图(2) E.coli 感染 和扩增