A c增加 低柱效 60%乙腈 40%水 柱效 80%乙腈 Time(min Time 溶剂洗脱强度增加 柱效增加
11 A B 2 3 A B 1 2 A B 1 2 增加 2 4 6 8 1 0 110 0 70 0 30 0 10 0 60% 乙腈 Time (min.) mAU 40% 水 溶剂洗脱强度增加 2000 1600 600 0 80% 乙腈 Time (min.) mAU 1000 20% 水 2 4 6 8 10 Inject Time 高柱效 低柱效 柱效增加
(二)溶剂的强度和选择性 1.溶剂的极性和强度可按 Snyder溶剂系统中的强度 因子来表示: 正相:P 反相:S 强度因子大时洗脱能力强 2溶剂系统的选择性分组:溶质和溶剂间作用力 为分类依据 3.混合溶剂的强度
12 （二）溶剂的强度和选择性 1. 溶剂的极性和强度 2. 溶剂系统的选择性 3. 混合溶剂的强度 可按Snyder溶剂系统中的强度 因子来表示： 正相：P′ 反相：S 强度因子大时洗脱能力强 分组：溶质和溶剂间作用力 为分类依据
四、正相键合相色谱法 固定性极性>流动相极性 口固定相:极性键合相 口流动相:烷烃(底剂)+极性调节剂 通过极性调节剂来改变溶剂强度 口分离对象:极性至中等极性的分子型化合物 口正相洗脱时,出峰顺序:极性小的组分先出峰
13 四、正相键合相色谱法 固定性极性 > 流动相极性 固定相：极性键合相 流动相：烷烃（底剂）+ 极性调节剂 分离对象：极性至中等极性的分子型化合物 正相洗脱时，出峰顺序：极性小的组分先出峰。 通过极性调节剂来改变溶剂强度
五、反相键合相色谱法 流动相极性>固定相极性 口固定相:非极性键合相 口流动相:甲醇-水、乙腈水,常加入弱酸、弱碱或 缓冲盐调节流动相pH以抑制组分离解,增加保留 口分离对象:分子型化合物 口反相洗脱时,出峰顺序:极性大的组分先出峰。 离子抑制色谱法离子对色谱法
14 五、反相键合相色谱法 流动相极性 > 固定相极性 固定相：非极性键合相 流动相：甲醇-水、乙腈-水，常加入弱酸、弱碱或 缓冲盐调节流动相pH以抑制组分离解，增加保留 分离对象：分子型化合物 反相洗脱时，出峰顺序：极性大的组分先出峰。 离子抑制色谱法 离子对色谱法
反相键合相色谱法 影响保留行为的主要因素 (1)溶质的分子结构 极性↓,疏水性↑,k个,t个 (2)流动相■与其表面张力和介电常数有关,有机溶剂 含量个,k 流动相的pH影响溶质的离解程度,离解 程度↑,k (3)固定相m随碳链延长,键合相疏水性↑,k↑ 碳链一定时,键合相浓度个,k个
15 反相键合相色谱法 影响保留行为的主要因素 （1）溶质的分子结构 （2）流动相 （3）固定相 极性，疏水性，k，tR 与其表面张力和介电常数有关，有机溶剂 含量，k 流动相的pH影响溶质的离解程度，离解 程度，k 随碳链延长，键合相疏水性， k 碳链一定时，键合相浓度， k