盐析的优缺点 优点 。成本低,不需要特别昂贵的设备。 。操作简单、安全。 。对许多生物活性物质具有稳定作用。 缺点 。分辨率低,产品杂质多
优点 成本低,不需要特别昂贵的设备。 操作简单、安全。 对许多生物活性物质具有稳定作用。 缺点 分辨率低,产品杂质多。 盐析的优缺点
常用盐析方法 。饱和硫酸铵沉淀法 。辛酸沉淀法 。辛酸-硫酸铵沉淀法
常用盐析方法 饱和硫酸铵沉淀法 辛酸沉淀法 辛酸-硫酸铵沉淀法
饱和硫酸铵沉淀法 硫酸铵的优点 。溶解度大 。分离效果好 。不易引起变性 。价格便宜,废液不污染环境
硫酸铵的优点 溶解度大 分离效果好 不易引起变性 价格便宜,废液不污染环境 饱和硫酸铵沉淀法
饱和硫酸铵的配制 饱和硫酸铵:100ml纯净水中加90g硫酸铵, 70~80℃溶解,趁热过滤,降至室温后即有结 晶析出,应任其留在瓶中。此种溶液的pH为5 左右,用于分离免疫球蛋白的pH要求为7.0~ 7.2,可用28%的NH4OH或2 M NaOH调节使 用
饱和硫酸铵的配制 饱和硫酸铵:100ml纯净水中加90g硫酸铵, 70~80℃溶解,趁热过滤,降至室温后即有结 晶析出,应任其留在瓶中。此种溶液的pH为5 左右,用于分离免疫球蛋白的pH要求为7.0~ 7.2,可用28%的NH4OH或2M NaOH调节使 用
操作流程 腹水10000g,15min 1ml腹水+1ml生理盐水 2ml饱和硫酸铵 50%饱和度硫酸铵,1h 5000rpm,15min 上清(清蛋白) 沉淀(球蛋白)
操作流程 腹水10000g,15min 1ml腹水+1 ml生理盐水 50%饱和度硫酸铵,1h 5000rpm,15min 上清 (清蛋白) 2 ml饱和硫酸铵 沉淀(球蛋白)