國表山压学花 dical Universi 省级精品课程申报 1 2 图1-1三类吸量管简图 1、2刻度吸量管3奥氏吸量管4移液管 【吸量管的使用】 (1)选用原则准确量取整数量液体,应选用奥氏吸量管。量取大体积时要用移 液管。量取任意体积的液体时,应选用取液量最接近的吸量管。如欲取0.15ml 液体,应选用0.2mL的刻度吸量管。同一定量试验中,如欲加同种试剂于不同 管中,并且取量不同时,应选择一支与最大取液量接近的刻度吸量管。如各试 管应加的试剂量为0.30、0.50、0.70、0.90mL时,应选用一支1.0mL刻度吸量 管。 (2)吸量管的使用 ①执管:将中指和拇指拿住吸量管上口以食指控制流速:刻度数字应朝向操作 者。 ②取液:把吸量管插入液体内(切忌悬空,以免液体吸入洗耳球内),用洗耳 球吸取液体至所取液量的刻度上端1-2Cm处,然后迅速用食指按紧吸量管上口, 使管内液体不再流出。 ③调准刻度:将已吸足液体的吸量管提出液面,用滤纸片抹干管尖外壁液体, 然后垂直提起吸量管于供器内口(管尖悬离供器内液面)。用食指控制液流至所 需刻度,此时液体凹面、视线和刻度应在同一水平面上,并立即按紧吸量管上 口。 ④放液:放松食指,让液体自然流入受器内,(如移液管标有“吹”字,则应
国表花 省级精品课程申报 将管口残余液滴吹入受器内)此时,管尖应接触受器内壁,但不应插入受器内的 原有液体之中,以免污染吸量管及试剂。 ⑤洗涤:吸取血液、尿、组织样品及粘稠试剂的吸量管,用后应及时用自来 水冲洗干净。如果吸取一般试剂的吸量管可不必马上冲洗,待实验完毕后,用 自来水冲洗干净。晾干水分,再浸泡于铬酸洗液中,数小时后,再用流水冲净, 最后用蒸馏水冲洗。晾干备用。 图1-2放液体时的姿势 2.微量移液器 微量移液器在生化实验中大量地使用,它们主要用于多次重复的快速定量移 液,可以只用一只手操作,十分方便。 移液器可分为二种:一种是固定容量的,常用的有10uL、100L和1000uL 等多种规格。另一种是可调容量的移液器,常用的有100μL、200μL、500uL和 1000如L等几种。每种移液器都有其专用的聚丙烯塑料吸头,吸头通常是一次性 使用,当然也可以清洗后重复使用,而且此种吸头还可以进行120℃高压灭菌。 ()微量移液器的结构 见图1-3,①液体吸收钮。②体积选取钮。⑧体积显示。④枪头排放钮。⑤枪头 排放器。⑥枪头接嘴。其内部柱塞分2段行程,第1档为吸液,第2档为放液。 期一 图1-3微量移液器的结构
园奉山年学花 edical Universit 省级精品课程申报 按闲 图1-4持移液器的姿势 注:推动按钮内部的活塞分2段行程,第一档为吸液,第二档为放液,手感十 分清楚。 (2)微量移液器的操作 ①调体积选取钮至所需体积值: ②套上枪头,旋紧: ③垂直持握微量移液器用大拇指按至第一档: ④将枪头插入溶液,徐徐松开大拇指,使其复原: ⑤将微量移液器移出液面,必要时可用纱布或滤纸拭去附于枪头表面的液体 (注意:不要接触吸头孔口): ⑥排放时,重新将大拇指按下,至第一档后,继续按至第二档以排空液体。 注意:移取另一样品时,按枪头排放钮弃掉枪头并更换新枪头。 3.容量瓶及量筒:容量瓶是一个细长颈梨形的平底瓶,具有磨口塞,颈上有 标线,表示在所示温度下(一般为20℃)当液体充满到标线时,液体体积恰好 与瓶下所注明的体积相等。容量瓶有10、25、50、100、200、250、500、1000 2000毫升等规格。 容量瓶是装量型的定量容器,多用作稀释溶液或配制精确试剂。当将液体加 至刻度后须用瓶塞塞好,颠倒混匀数次方可使用。 容量瓶是较精确的定量容器,不得直接加热或烘烤,也不应将盛有溶液的容 量瓶放入冰箱内。当配制溶液需要加热促其溶解时,必须在烧杯中加热溶解, 并待溶液达到室温后,再定量地转入容量瓶内,然后稀释到刻度,并要注意摇 匀
@春山单花 省级精品课程申报 当所量取的液体量要求不十分准确时,可使用量筒,因其较使用吸管或量瓶更 为简便,量筒之底座及筒身是焊接一起的,因而不能量取过热液体,更不能直 接加热,以防炸裂。 3.滴定管:滴定管是供容量分析滴定之用,有带玻塞及橡皮管的两种类型 前者用以量酸,后者用以量碱。 滴定管有刻度较精细的微量滴定管,有1.0、2.0、5.0、10毫升等规格。还 有25、50、100毫升等规格的常量滴定管。使用滴定管应该注意以下事项: ①检查是否清洁干燥,是否漏水,玻塞是否滑润,如有漏水或转动不灵,应 拆下活塞重新涂抹凡士林。涂抹前要将玻塞擦干,用手指沾少量凡士林在活塞 两头各擦一薄层,将活塞插入槽内,然后向同一方向转动活塞,直到从外面看 时,全部透明为止。油涂好后,在活塞的小头的槽上套一橡皮圈,以防活塞滑 脱。 ②使用前必须认出每一格表示多少毫升。先用少量滴定液清洗滴定管23次, 然后方可装液。装液体后,管内如有气泡必须排出。 ③滴定前先应读取起始点。滴定时,左手控制玻塞,右手持瓶,边滴边摇, 密切注意被滴定溶液的颜色变化。 ④装置滴定管时,管身必须与地面垂直。读数时眼睛与溶液月形面下缘在同 水平线上,不要仰头或低头读数。 ⑤如用酸式滴定管装碱性溶液,滴定后应立即洗净,以免活塞粘连 二、一般操作技术 1、混匀法:欲使一化学反应充分进行,必须使反应体系内各种物质迅速地相 互接触,因此除特别规定外,一般都需要将反应物彻底混匀。混匀方式大致有 以下几种,可随使用的器皿的液体容量而选用。 (1)旋转混匀法:手持容器作离心旋转,适用以未盛满液体的试管或小口器 皿,如三角瓶等。 (2)弹指混匀法:左手持试管使之直立,以右手食指轻击试管之下部,使管 内溶液作旋转流动。 (3)倒转混法:适用于有玻璃塞的瓶子,如容量瓶等。 (4)弹动混匀法:以右手大拇指、食指、中指握住试管上部,将试管放平
园本山年学花 省级精品课程申报 于左手掌中弹动。 (5)吸管混匀法:用吸管将溶液反复吸放数次,适用于量少而无沉淀的液体 (6)搅拌混匀法:适应烧杯等大口容器所盛之溶液的混匀,一般在配制混合 试剂时,用玻棒搅拌以助溶,或混匀大量的溶液。 2、保温与加热:为使某一化学反应在一定的温度下进行,常需要保温;为促 进或停止化学反应,有时需要加热。实验过程中要随时监测温度,并及时调节 (1)保温:常用恒温箱或恒温水浴进行,后者的温度较前者稳定。 (2)加热:加热常用两种方法,一是直接把试管、烧杯等器皿在酒精灯、电 炉或煤气火焰上加热:二是在水浴中加热或煮沸,应根据实验的目的而定。 3、过滤:过滤的目的是将沉淀与液体分开,用于收集滤液,收集沉淀或洗涤沉 淀。在生化实验中如用于收集滤液应选用干滤纸,不应将滤纸先弄湿,湿滤纸 将影响滤液的稀释比例。滤纸过滤一般采用平析法(即对折后,再对折)并且使 滤纸上缘与漏斗壁完全吻合,不留缝隙。向漏斗内加液时,要用玻棒引导而且 不应倒入过快,勿使液面超过滤纸上缘。较粗的过滤可用脱脂棉或纱布代替滤 纸。有时以离心沉淀法代替过滤法可达到省时、快捷的目的。 三、酸度计的使用方法(以雷磁25型酸度计为例) 酸度计是测定溶液H值的重要精密仪器。实验室常用的是国产雷磁25型酸 度计(最小分度0.1pH)和pS-2型酸度计(最小分度0.02p),可用于p测 定和电动势测定。 1.使用方法 (1)安装电极 仪器配备221型玻璃电极和222型甘汞电极。把玻璃电极的塑料帽夹在电极 夹的夹子上,插头插在插孔内。把某汞电极的金属帽夹在电极夹的另一夹子上, 由于它具有金属的帽子,可直接与仪器内部形成回路。两个电极的高度,可利 用电极夹上的支头螺丝调节。 (2)校正 ①首先,将“p-mv”开关拨到“pH”位置。然后,打开电源开关,指示灯 亮后,应预热5分钟。最好预热时间在半小时以上,以使零点有较好的稳定性