@春山单花 省级精品课程申报 方法，严格遵守操作规程，严禁随意开动。 7.要节约水电，一经用完随手关闭水门、电门。 三、值日生任务 1.领发本次所用仪器、物品，清点、交还临时用仪器、物品，若有损坏负 责追查赔偿。 2.管理操作公用仪器，打蒸馏水。 3.搞好实验室卫生，做到仪器、桌面、地面、水池…全干净。 4.确保安全：管好仪器、门窗、水电。 5.请任课及实验室老师检查工作，认可后方能离开实验室。 四、试剂使用规则 1.使用试剂前应仔细辨认标签，看清名称及浓度，是否为本实验所需要。 2.取出试剂后，立即将瓶塞盖好，切勿盖错，放回原处。试剂瓶塞、专用 吸量管、滴管，不得与试剂瓶分家，以兔错用而污染试剂，造成自己或他人实 验的失败。未用完的试剂不得倒回瓶内。昂贵的Sephadex、Sepharose凝胶和 DEAE纤维素等，用后必须及时回收，不得丢弃。 3.使用滴管时，滴管尖端朝下，切勿倒置，勿使试剂流入橡皮帽内。 4.使用有毒试剂及强酸强碱时，尽可能用量筒量取，若用吸管时只能用吸 耳球吸取，切勿用嘴吸取，以兔造成意外。 五、废弃物处理 1.所有固体废弃物如：用过的滤纸、棉花、碎屑沉淀物和电泳后的凝胶等 必须倾弃于垃圾筒中。 2.浓酸必须弃于小钵中，用水稀释后倒入水池中。 六、安全注意事项 1,低沸点有机溶剂，如乙醚、石油醚、酒精等均系易燃物品，使用时应禁 明火、远离火源，若需加热要用水浴加热，不可直接在火上加热。 2.若发生酸碱灼伤事故，先用大量自来水清洗，酸灼伤者用饱和NaHC0溶 液中和，碱灼伤者用饱和HB0溶液中和，氧化剂伤害者用NaS0:处理。 3.若发生起火事件，根据发生起火性质分别采用砂、水、C02或CC1:灭火器
⑧来山压学花 省级精品课程申报 扑灭。 4,离开实验室必须关好窗户，切断电源、水源，以确保安全。 七、实验室意外事故的处理 实验室如遇着火、烫伤、割伤等意外事件发生，必须镇静，作紧急处理， 并立即报告教员，作如下处理： 1、着火：如洒精灯推倒或其他原因起火，首先将一切易燃物品移至安全处， 然后将火扑灭。灭火方法：可用湿布或工作服盖上扑灭，或盖上一层沙扑灭。 如乙醚、油类等比水轻易燃的物品着火时，切勿用水，火势大时速取灭火器灭 之。 2、火伤：皮肤被火灼伤，用烫伤软膏涂之，如伤势较重，即送医院。 3、药品伤：皮肤被药品所侵蚀，应据药品的性质加以适当处理后，用单宁油 膏或凡士林涂之，如是酸或碱，则先用大量水冲洗，然后用5%的小苏打液或1% 醋酸分别处理。 如眼晴为药品所侵入，用水洗去后，继以5%的小苏打液或1%的硼酸液冲洗， 视侵入药品的性质而定。必要时，去医院处理。 4、割伤出血：凡遇到玻璃割伤出血，可用碘酒或红药水消毒后（切忌碘酒与 红药水同时应用)，用纱布包扎。如有玻璃留在伤口，应先取出再作处理。 5、毒物入口：有毒之物切勿用吸管直接用口吸取。如遇毒物入口，除酸、碱 外，应先使之呕吐，用芥子粉或0.06克吐酒石溶于2毫升水中作致吐剂，温盐 水肥皂水也可用。如是腐蚀性物质，则饮以鸡蛋清作润滑剂
@表山年花 es 省级精品课程申报 第二节生物化学实验基本操作 一、玻璃仪器的清洁及使用 (一)玻璃仪器的清洁 1.玻璃仪器的清洗 实验中所用的玻璃仪器清洁与否，直接影响实验的结果，往往由于仪器的 不清洁或被污染而造成较大的实验误差，有时甚至会导致实验的失败。做生物 化学实验对玻璃仪器清洁程度的要求，比一般化学实验的要求更高。这是因为： ①生物化学实验中蛋白质、酶、核酸等往往都是以“毫克”和“微克”计的， 稍有杂质，影响就很大。②生物化学实验对许多常见的污染杂质十分敏感，如 金属离子（钙、镁离子等）、去污剂和有机物残基等，因此玻璃仪器（包括离 心管等塑料器皿)是否彻底清洗净就是非常重要的。 ()新购玻璃仪器的清洗 新购买的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性物质，可先用0.5%的去污剂洗 刷，再用自来水洗净，然后浸泡在1%一2%盐酸溶液中过夜（不可少于四小时）， 再用自来水冲洗，最后用无离子水冲洗两次，在100℃一120℃烘箱内烘干备用。 (②)使用过的玻璃仪器的清洗 一般非计量玻璃仪器或粗容量仪器：如试管、烧杯、量筒等普通玻璃仪器 可直接用毛刷蘸餐洗净刷洗，然后用自来水冲洗，直至容器内不挂水珠即可。 最后用少量蒸馏水冲洗内壁2一3次，倒置晾干即可。 容量分析仪器：容量瓶、滴定管及吸管等容量仪器，用后用自来水多次冲洗， 如能清洁（壁不挂水珠），再用蒸馏水少量冲洗23次晾干即可备用。若仍不干 净附有油污等，则须于干后放入铬酸洗液内浸泡数小时，然后倒净（或捞出） 洗液，用自来水充分冲洗至水不显黄色后再冲几次，最后用少量蒸馏水冲洗23 次晾干备用。 (3)比色皿的清洗 决不可用强碱清洗，因为强碱会浸蚀抛光的比色皿。只能用洗液或1%~一2 %的去污剂浸泡，然后用自来水冲洗，这时使用一支绸布包裹的小棒或棉花球 棒刷洗，效果会更好，清洗干净的比色皿也应内外壁不挂水珠。切忌用刷子、 粗糙的布或滤纸等擦试。洗净后，倒置晾干备用
国泰山华花 省级精品课程申报 2.塑料器皿的清洗 聚乙烯、聚丙烯等制成的塑料器皿，在生物化学实验中已用的越来越多。 第一次使用塑料器皿时，可先用8mol/几尿素（用浓盐酸调pl=1)清洗，接着 依次用无离子水、1mo1/LK0H和无离子水清洗，然后用10一3mol/LDTA除 去金属离子的污染，最后用无离子水彻底清洗，以后每次使用时，可只用0.5 %的去污剂清洗，然后用自来水和无离子水洗净即可。 3.洗液的配制 因己确定铬有致癌作用，因此配制和使用洗液时要极为小心，常用两种配 制方法如下： ()取100L工业浓硫酸置于烧杯内，小心加热，然后慢慢加入5g重铬酸 钾粉末，边加边搅拌，待全部溶解并缓慢冷却后，贮存在磨口玻璃塞的细口瓶 内。 (2)称取5g重铭酸钾粉末，置于250mL烧杯中，加5ml.水使其溶解，然后 慢慢加入100mL浓硫酸，溶液温度将达80℃，待其冷却后贮存于磨口玻璃瓶内 4.其他洗涤液 ()工业浓盐酸：可洗去水垢或某些无机盐沉淀。 (2)5%草酸溶液：用数滴硫酸酸化，可洗去高锰酸钾的痕迹。 (3)5%~10%磷酸三钠(Na3P0412H20)溶液：可洗涤油污物。 (4)30%硝酸溶液：洗涤二氧化碳测定仪及微量滴管。 (⑤)5%一10%乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)溶液：加热煮沸可洗脱玻璃仪 器内壁的白色沉淀物。 (6)尿素洗涤液：为蛋白质的良好溶剂，适用于洗涤盛过蛋白质制剂及血样 的容器。 (⑦)有机溶剂：如丙酮、乙醚、乙醇等可用于洗脱油脂、脂溶性染料污痕等 二甲苯可洗脱油漆的污垢。 (8)氢氧化钾的乙醇溶液和含有高锰酸钾的氢氧化钠溶液：这是两种强碱性 的洗涤液，对玻璃仪器的侵蚀性很强，可清除容器内壁污垢，洗涤时间不宜过 长，使用时应小心慎重。 5.玻璃和塑料器皿的干燥： 生化实验中用到的玻璃和塑料器皿经常需要干燥，一般地说洗净后的玻璃仪
国秦花 省级精品课程申报 器，如不急用应倒放在晾架上令其自然干燥。若有急用可放在烘烤箱中110℃一 120℃烤干，但容量玻璃仪器，如容量瓶、吸量管、滴定管以及烧结、结构复杂 的玻璃仪器等，严禁烘烤。此类仪器，如急用可采用水泵抽气法干燥。硝酸纤 维素的塑料离心管加热时会发生爆炸，所以决不能放在烘箱中干燥，只能用冷 风吹干。 (二)常用玻璃仪器的使用 1、吸量管 吸量管是生化实验最常用的仪器之一，测定的准确度和吸量管的正确选择和使 用有密切关系。常用的吸量管可以分为三类： (①)刻度吸量管刻度吸量管是多刻度吸量管，供量取10mL以下任意体积的 溶液，有0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0毫升等规格。吸量管刻度所标 的数字有自上而下和自下而上两种，使用之前应仔细分辨。有“快”字则为快 流式，有“吹”字则为吹出式，无“吹”字的吸管不可将管尖的残留液吹出。 吸、放溶液前要用吸水纸擦拭管尖。 (2)移液管常用来量取50mL、25mL、10mL、5mL、2mL、1mL的液体，这种 吸量管只有一个刻度，放液时，量取的液体自然流出后，管尖需在盛器内壁停 留15秒钟，注意管尖残留液体不要吹出。 (③)奥氏吸量管在量取粘度较大的液体如血液、血清等时，应当使用奥氏 吸管。这种吸管也是单标的，并且在其下端有一个膨大部分。所以液体与吸管 表面接触面积较小，当量取血液时，较他种吸管准确。奥氏吸管的容量包括遗 留在尖端的液体，故在缓缓使液体流出后，再停留数秒钟，吹出最后一滴。在 学生实验中常用的有0.5、1.0、2.0、3.0ml等规格