第三节培养基的选择 在建立一个新的实验体系时,为了能研 制出一种适合的培养基,最好先由一种 已被广泛使用的基本培养基(如Ms培养基 或B5培养基)开始。当通过一系列的实验, 对这种培养基做了某些定性和定量的小 变动之后,即有可能得到一种能满足实 验需要的新培养基,选择最佳培养基 常用试验方法主要有单因子试验、多因 子试验及广谱实验等
第三节 培养基的选择 • 在建立一个新的实验体系时，为了能研 制出一种适合的培养基，最好先由一种 已被广泛使用的基本培养基(如Ms培养基 或B5培养基)开始。当通过一系列的实验， 对这种培养基做了某些定性和定量的小 变动之后，即有可能得到一种能满足实 验需要的新培养基，选择最佳培养基。 常用试验方法主要有单因子试验、多因 子试验及广谱实验等
单因子试验 在单因子试验中.由于培养基中其他成分都维持在一般水平 变动一个因子,就可以找出这一因子对试验的影响和影响 度。例如Ms基本培养基 他成分和用量都 NAA用量对某一培养物生根的影响,这种只研究一个因素的试验 就是单因子试验 生物学试验不同于物理学或化学试验,最显著的差别是在生物 试验中必需设置对照组与试验组,试验组可以有一组或几组 约氯续生验不琳组概物织数其他物要述劲 在遗传性、生理状态、前培养条件等方面,尽可能 致。以 堡试验结果是来源于试验因子,而不是由于试验材料的不一致 ·试验中各处理一般都要设有 重复,以取得可靠的试验结果 随试验规模和要求不同,大多 霉的 项目要有4-10瓶,每瓶至少3 块培养物或3丛小幼苗
一、单因子试验 • 在单因子试验中．由于培养基中其他成分都维持在一般水平上， 所以只变动一个因子，就可以找出这一因子对试验的影响和影响 的程度。例如Ms基本培养基的其他成分和用量都不变，只变动 NAA用量对某一培养物生根的影响，这种只研究一个因素的试验 就是单因子试验。 • 生物学试验不同于物理学或化学试验，最显著的差别是在生物学 试验中必需设置对照组与试验组，试验组可以有一组或几组，随 试验的复杂性而设置，对照组也可能有一组以上。试验中要求对 照组与试验组中的试验个体，即植物组织块或其他培养物，必须 在遗传性、生理状态、前培养条件等方面，尽可能完全一致。以 保证试验结果是来源于试验因子，而不是由于试验材料的不一致 导致的。 • 试验中各处理一般都要设有一定的重复，以取得可靠的试验结果。 随试验规模和要求不同，大多每个项目要有4—10瓶，每瓶至少3 块培养物或3丛小幼苗
多因子试验 对培养基中两个或两个以上因素进行研究的试验称为多因子实验,试验可采用完全 试验方案,也可选用正交设计方案,完全试验方案具有均衡完全的特点,各个因 的每个水平都相互搭配,构成了所有可能的处理组合,如研究NAA和6BA的最佳浓 度组合,每个因子各设5个浓度水平(0,0.5,25,5,10mg/L),这两种因子各种 浓度的所有组合,就构成了一个具有25项处理的试验见表3-3。 2种激素5种浓度的实验组合 6-BA mg/L)00.52.5 10 NAa 0 (mg/L)0.5 789 121314 15 1617 1819 20 102122232425
2种激素5种浓度的实验组合 6-BA mg/L） 0 0.5 2.5 5 10 NAA 0 1 2 3 4 5 (mg/L) 0.5 6 7 8 9 10 2.5 11 12 13 14 15 5 16 17 18 19 20 10 21 22 23 24 25 对培养基中两个或两个以上因素进行研究的试验称为多因子实验，试验可采用完全 试验方案，也可选用正交设计方案，完全试验方案具有均衡完全的特点，各个因子 的每个水平都相互搭配，构成了所有可能的处理组合，如研究NAA和6—BA的最佳浓 度组合，每个因子各设5个浓度水平(0，0.5，2.5，5，10mg／L)，这两种因子各种 浓度的所有组合，就构成了一个具有25项处理的试验见表3—3。 二、多因子试验
完全试验方案试验因子越多,处理数越多,试验越复杂,消耗的 精力、物力越多。为了减少试验处理,但又能准确全面地获得试 验信息,通常采用正交试验。例如,采用正交设计,在使用此表 时就可以安排4个因子,3种水平的试验,一共做9种不同搭配的试 ,其结果相当于做了27次种种搭配的试验。正交试验虽然是 因素搭配在一起的试验,但是在试验结果的分析中,每一种因素 所起的作用却又能够明白无误地表现出来。因此,一次系统的试 验结果,就可以把问题分析得清清楚楚,用有限的时间取得成倍 的收获。在组织培养研究中,可用于同时探求培养基中适宜的几 种成分的用量,如细胞分裂素、生长素、糖和其他成分的用量
• 完全试验方案试验因子越多，处理数越多，试验越复杂，消耗的 精力、物力越多。为了减少试验处理，但又能准确全面地获得试 验信息，通常采用正交试验。例如，采用正交设计，在使用此表 时就可以安排4个因子，3种水平的试验，一共做9种不同搭配的试 验，其结果相当于做了27次种种搭配的试验。正交试验虽然是多 因素搭配在一起的试验，但是在试验结果的分析中，每一种因素 所起的作用却又能够明白无误地表现出来。因此，一次系统的试 验结果，就可以把问题分析得清清楚楚，用有限的时间取得成倍 的收获。在组织培养研究中，可用于同时探求培养基中适宜的几 种成分的用量，如细胞分裂素、生长素、糖和其他成分的用量
逐步添加和逐步排除的试验 方法 在植物组织分化与再生的研究中,在没有取得 可靠的分化与再生之前,往往添加各种有机营 养成分,而在取得了稳定的再生之后,就可以 逐步减少这些成分。在逐步添加时是使试验成 功,在逐步减少时是缩小范围,以便找到最有 影响力的因子,或是为了实用上的需要竭力使 培养基简化,以降低成本和利于推广。在寻求 最佳激素配比时,也经常用到这种加加减减的 简单方法
三、逐步添加和逐步排除的试验 方法 • 在植物组织分化与再生的研究中，在没有取得 可靠的分化与再生之前，往往添加各种有机营 养成分，而在取得了稳定的再生之后，就可以 逐步减少这些成分。在逐步添加时是使试验成 功，在逐步减少时是缩小范围，以便找到最有 影响力的因子，或是为了实用上的需要竭力使 培养基简化，以降低成本和利于推广。在寻求 最佳激素配比时，也经常用到这种加加减减的 简单方法