续前 四、HPLC的特点和应用 快 高柱效—n=104片/米,柱效高(远高于一般LC) 高灵敏度 高选择性 分析速度快 应用范围广泛(可分析80%有机化合物)
续前 四、HPLC的特点和应用 “三高” “一快” “一广” 高柱效——n=104片/米，柱效高（远高于一般LC） 高灵敏度 高选择性 分析速度快 应用范围广泛（可分析80%有机化合物）
第二节基本理论和条件选择 热力学理论:塔板理论—平衡理论 基础 动力学理论:速率理论— Vander方程 塔板理论 速率理论 HPLC法中分离条件的选择
第二节 基本理论和条件选择 热力学理论：塔板理论——平衡理论 基础 动力学理论：速率理论——Vander方程 一、塔板理论 二、速率理论 三、HPLC法中分离条件的选择
塔板理论 HR=L/ )2=16 W Hc=l/n )2=5.54( W k 1+k
一、塔板理论 H理 = L / n 理 2 2 1 2 2 ( ) 5.54( ) 16( ) W t W t t n R R R = = = 理 Heff L neff = / 2 1 2 ' 2 ' 16( ) 5.54( ) W t W t n R R eff = = 0 ' t t k R = 2 ) 1 ( k k n n eff + = 理
速率理论(与GC对比) 1.GC:H=A+B/u+C.(填充柱) 或H=B/+C·u(毛细管柱) A=2/ dp Ao n dp B=2y·D,=2y·D B R B∝D T D∞-或D d C=C+c +C1=C D,∞ 77
二、速率理论（与GC对比） GC：H = A+ B/ u +C u （填充柱） 或 H = B/u +Cu （毛细管柱） A = 2 dp A dp B Dm Dg = 2 = 2 R B Dg B t ， M T D T Dg 或 g C = Cm +Cs = Cg +Cl = Cl l l D df C 2 T DL 1
续前 HPLC:H=A+C u ∵B=2y·DnD 柱温T√低,流动相n个大→B相忽略 讨论: 1)流动相流速对HPLC板高的影响(与GC对比)next >1cm/s时,H∞u u→H,n个→柱效个,但t2个 →兼顾柱效和分析时间,选择u=1m/min 2)涡流扩散项及其影响next A=2/ dp Aon. dp ,d→A→H,n个→柱效个
续前 2）涡流扩散项及其影响 next HPLC：H = A+C u B Dm = 2 T Dm 柱温T 低，流动相 大 B相忽略 R u H n t u c m s H u ， 柱效 ，但 1 / 时， 兼顾柱效和分析时间，选择u =1ml / min 2. ➢ 讨论： 1）流动相流速对HPLC板高的影响（与GC对比）next A = 2 dp A dp ，dp A H ，n 柱效